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目的：近20年来,溶瘤病毒疗法已经被证实是一种新型有效的肿瘤治疗策略.如腺病毒、单纯疱疹病毒和新城疫病毒等溶瘤病毒能够在肿瘤细胞中复制增殖并直接杀伤肿瘤细胞.并且,使用选择复制型溶瘤病毒的治疗由于其肿瘤特异性使其成为一种有前景的、安全的肿瘤治疗方法.我们构建了一种新型溶瘤单纯疱疹病毒(OV-3G),该病毒基因组中一个关键复制基因由一个肿瘤特异性的启动子调控,这使得该病毒具有只在肿瘤细胞而非正常细胞中复制增殖的能力.进而,我们通过体内外实验评估了OV-3G的抗肿瘤效果.方法：我们构建了一个稳定转染pIE的细胞系,该细胞系作为生产细胞系稳定表达病毒关键复制性蛋白,进而用于OV-3G的构建及后续试验.之后,我们构建了含有肿瘤特异性TERT启动子的pTp质粒和含有绿色荧光蛋白的pGFP质粒,用于后续病毒的同源重组,以将病毒基因组内原IE启动子替换为肿瘤特异性启动子.接着,我们通过同源重组的方法构建了OV-3G和OV-3G-GFP.而后,我们检测了OV-3G在12种肿瘤细胞系(Hep-G2,RCC-krause,MCF-7,A549,PC-3,LoVo,HT-29,Hep-2,HeLa,MDA-MB-231,PG和BJC813)中的溶瘤活性.同时我们也检测了OV-3G在两种特殊细胞系(C1和C2)的溶瘤活性,在这两种细胞系中肿瘤特异性启动子具有极低的活性甚至没有活性.最后,我们检测了OV-3G在HT-29和C1异种肿瘤模型的抗肿瘤效果.结果：在两种正常细胞系中,我们没有观察到细胞病变(MOI=2,感染24小时).OV-3G在12种肿瘤细胞系的体外实验中显现出了明显的溶瘤活性,而在C1和C2中未显现出溶瘤活性.瘤内注射OV-3G显著抑制了HT-29肿瘤生长,而对C1肿瘤无明显抑制作用.结论：OV-3G可以作为一种肿瘤特异性新颖有效的抗肿瘤制剂.