【摘 要】
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[目的]探讨PI3K抑制剂LY294002对胃癌细胞MGC-803的磷脂肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路活性及细胞株的生物学行为的影响。[方法]
【机 构】
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东南大学公共卫生学院,环境医学工程教育部重点实验室,江苏南京210009
【出 处】
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第十二届全国环境与职业医学研究生学术研讨会暨复旦大学博士生论坛公共卫生篇
论文部分内容阅读
[目的]探讨PI3K抑制剂LY294002对胃癌细胞MGC-803的磷脂肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路活性及细胞株的生物学行为的影响。[方法]应用LY294002作用于胃癌细胞MGC-803,分别应用实时荧光定量PCR和免疫印迹法(Western blot)检测PI3K/AKT/mTOR通路中关键信号分子PTEN、PI3K、AKT、mTOR、P70S6K、4EBP的mRNA和蛋白的表达情况；同时通过MTT实验、流式细胞术,测定LY294002对胃癌细胞株MGC-803的增殖、周期和凋亡的影响。[结釆]实验组(LY294002)的PI3K、PTEN、AKT、mTOR、4EBP、P70S6K基因的mRNA表达情况与对照组DMSO组)相比存在显著性差异(P＜005),且AKT、mTOR、4EBP、P70S6K表达量随着LY294002浓度升高逐渐下降；LY294002对MGC-803细胞AKT、p-mTOR、p-70S6K、p-AKT的蛋白表达有明显抑制作用,且p-mTOR、p-70S6K、p-AKT的蛋白表达随着LY294002浓度升高逐渐下降；增殖实验显示,LY294002对MGC-803细胞有增殖明显的抑制作用,增殖率随LY294002浓度升高逐渐降低；周期实验结果显示,加入LY294002的MCG-803细胞相比于对照组细胞S期比例明显较高；凋亡实验显示,LY294002组的凋亡细胞比例明显高于对照组。[结论]抑制剂LY294002可作用于MGC-803细胞使其PI3K/AKT/mTOR信号转导通路关键信号分子均存在不同程度抑制作用,且某些基因的mRNA和磷酸化蛋白的表达量随LY294002浓度升高呈下降趋势,且LY294002可降低细胞增殖率、改变细胞周期比例、提高细胞凋亡率。
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