【摘 要】
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采用无氮培养基,结合乙炔还原法测定,从中分离内生固氮菌43株,其中叶部8株,茎部24株,根部11株；分离得到内生固氮菌各菌株的固氮酶活性分布在1.23 nmol C2H2 mL-1·h-1(菌
【机 构】
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华南农业大学资源环境学院华南农业大学农学院,广州,510642
【出 处】
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第十二届全国土壤微生物学术研讨会暨第五届全国微生物肥料生产技术研讨会
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采用无氮培养基,结合乙炔还原法测定,从中分离内生固氮菌43株,其中叶部8株,茎部24株,根部11株；分离得到内生固氮菌各菌株的固氮酶活性分布在1.23 nmol C2H2 mL-1·h-1(菌株ZF11)至506.46 nmol nmol C2H2 mL-1·h-1(菌株ZF10)之间.经固氮酶基因(nifH)的PCR扩增检测,43株各类群内生固氮菌均能扩增出固氮酶基因(nifH)片段.采用SDS-PAGE全细胞蛋白电泳,在85％的相似性水平上将所有菌株聚为6个类群(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ).IS-PCR的聚类结果与蛋白聚类分析结果相似.对各类群相应代表菌株(ZF3,ZF8,ZF13,ZF15,ZF24,ZF43)的Biolog板测定结果显示,来自不同类群的菌株碳源利用差异显著.对各类群代表菌株做了环境因子适应试验,测定其在不同环境条件下的固氮酶活性,结果表明,供试菌株在30℃～35℃,pH6.0～7.0,1.5％以下的盐分(NaCl)浓度,1.0 mmol·L-1 NH4+浓度,培养24～48小时的条件下,具有较高的固氮酶活性.菌株对环境的适应能力较强.16S rDNA序列分析表明,其中类群Ⅰ和Ⅱ的菌株属于克雷伯氏属不同种群；类群Ⅲ的ZF13与Burkholderia cepacia的相似性为98％；类群Ⅳ和类群Ⅵ的菌株代表肠杆菌属的不同种群；类群Ⅴ的菌株属于假单胞菌属.这些表明高杆野生稻内生固氮菌具有较大的多样性.
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