【摘 要】
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目的：建立12h内快速检测粪便中沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157:H7的多重PCR方法。 方法：探讨已报道的多重PCR体系检测粪便中3种目的菌的可行性，根据沙门菌invA基因、志贺菌ipa
【机 构】
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成都 610041,四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室
【出 处】
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首届传染病防控基础研究与应用技术论坛
论文部分内容阅读
目的：建立12h内快速检测粪便中沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157:H7的多重PCR方法。
方法：探讨已报道的多重PCR体系检测粪便中3种目的菌的可行性，根据沙门菌invA基因、志贺菌ipaH基因及大肠杆菌O157:H7rfbE基因筛选设计新引物，优化反应条件，测定方法灵敏度和特异性。8h短时增荫后，对24份模拟粪便样品进行检测。
结果：已报道的多重PCR体系不适用于粪便中三种目的菌的检测：新建立的体系适用于粪便样品的检测，能在12 h内同时检测3种目的菌。通过短时增菌，该体系对粪便样品中沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157:H7的灵敏度分别为：8.5CFU/10ml增菌液，27CFU/10ml增菌液，5 CFU/10ml增菌液。对28株目的菌和13株非目的菌的检测结果表明该方法具有良好特异性。
结论：成功建立能在12h内同时检测粪便样品中沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157:H7的多重PCR检测方法，该方法特别适用于健康带菌者3种目的菌的快速筛查，为卫生检验检疫、食品微生物安全的监测和监督提供一有用的工具。
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