【摘 要】
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本文根据黑曲霉phyA基因序列和酒精酵母菌表面展示质粒载体pYD1上的多克隆位点设计引物,从黑曲霉总RNA中反转录后扩增得到phyA基因,把该基因连接到表面展示质粒载体pYD1
【机 构】
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曲阜师范大学生命科学学院曲阜273165
【出 处】
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全国酵母技术研究与酵母新产品开发应用新技术、新设备交流研讨会
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本文根据黑曲霉phyA基因序列和酒精酵母菌表面展示质粒载体pYD1上的多克隆位点设计引物,从黑曲霉总RNA中反转录后扩增得到phyA基因,把该基因连接到表面展示质粒载体pYD1上,成功构建了重组质粒pYDl-phyA,并转化用于表面展示的酵母EBY100菌株中,得到酵母转化子,PCR扩增证实了植酸酶基因已整合到酵母基因组中。以不含载体和含空载体的酵母菌为对照,加2％(w/v)的半乳糖诱导36h后,利用免疫荧光法在荧光显微镜下检测到了来源于黑曲霉的植酸酶phyA展示在酵母菌细胞表面,并对其酶学性质进行分析。
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