氯霉素高特异抗体的制备与纯化

来源 :2012第五届中国北京国际食品安全高峰论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wwg139580
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  目的:自制免疫亲和层析柱,采用亲和层析法获取高纯度的抗氯霉素抗体并对其进行活性分析。方法:采用硫酸铵分级沉淀法对抗体进行初步提取。然后选用3,3一二氨丙基亚胺(DAJDPA)作为亲和凝胶与配基氯霉素之间的“间隔臂”,制备分离纯化抗氯霉素特异性IgG的亲和层析柱,对IgG粗品进行亲和层析纯化,并用ELISA法检测其活性。结果:经饱和硫酸铵分级沉淀,可除去大部分的杂蛋白,较好实现对目标蛋白的初步分离;采用自制的免疫亲和层析柱,可获得高纯度的兔抗氯霉素抗体,检测其活性比纯化前提高了4倍,交叉反应结果显示抗体对CAP有高的特异性,对其他类似药物无反应活性。结论:应用本试验所建立的方法可得到高纯度的抗氯霉素抗体,为氯霉素的免疫检测奠定了基础。
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