【摘 要】
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The soluble form of the transmembrane glycoprotein,FcεRIα which corresponds to the high-affinity receptor for IgE,is found in serum.Growing evidence suggests the pathogenic role of IgE and FcεRI in au
【机 构】
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Department of Laboratory Medicine,Shanghai General Hospital,Shanghai Jiao Tong University School of
【出 处】
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2017上海市医学会变态反应学术年会
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The soluble form of the transmembrane glycoprotein,FcεRIα which corresponds to the high-affinity receptor for IgE,is found in serum.Growing evidence suggests the pathogenic role of IgE and FcεRI in autoimmune diseases.The goal of this study is to develop a sensitive and standardized cytometric assay for quantification of sFcεRIα.A membrane emulsification technique was utilized to incorporate CuInS2/ZnS quantum dots and Fe3O4 nanoparticles into poly(styrene-co-maleic anhydride)microbeads.The beads were then carboxylated and coated with capture antibody monoclonal anti-human FcεRIα.This antibody binds to FcεRIα but does not block the binding of FcεRIα to IgE.After incubation with standards or serum samples,the microbeads were incubated with excessive native human IgE,followed by incubation with phycoerythrin(PE)conjugated anti-human IgE.The resulting quantum dot microbeads were gated,and sFcεRIα quantification was analyzed based on PE fluorescence intensity.The method exhibited good linearity(R2>0.99),and the limit of detection was established at 0.29 ng/mL with the dynamic range of up to 200 ng/mL.The precision of the assay validated by intra-and inter-assay variability met the acceptance criteria with the mean recovery falling within 80%-110%of the theoretical concentration and a corresponding CV<20%.Compared to commercial ELISA kit,this novel method is more sensitive and efficient.It allows for the simple comparative analysis of sFcεRIα levels in health and disease.
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