【摘 要】
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[背景和目的]萜类化合物的生物合成途径主要包括两条途径,其中一条是定位于高等植物质体中的2-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(MEP)途径,其中,1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-焦磷酸还原酶(HDR)是MEP途径中最后一个酶.本研究对蛇足石杉HDR酶基因HsHDR1与HsHDR2进行了克隆及序列分析.[材料和方法]本课题组以蛇足石杉全草(采自海南省霸王岭自然保护区)为材料,对蛇足石杉的基因
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所,北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物
【出 处】
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首届西部中医药论坛暨中华中医药学会中药资源学分会成立大会、2015药植论坛、中药资源与大健康产业峰会
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[背景和目的]萜类化合物的生物合成途径主要包括两条途径,其中一条是定位于高等植物质体中的2-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(MEP)途径,其中,1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-焦磷酸还原酶(HDR)是MEP途径中最后一个酶.本研究对蛇足石杉HDR酶基因HsHDR1与HsHDR2进行了克隆及序列分析.[材料和方法]本课题组以蛇足石杉全草(采自海南省霸王岭自然保护区)为材料,对蛇足石杉的基因表达谱进行了分析,从中发现了一个小的HsHDR基因家族,包括HsHDR1与HsHDR2两个转录本.利用RT-PCR方法扩增获得到这两个基因的全长cDNA序列,并利用生物信息学方法对其理化性质、结构域、蛋白二级结构及三维结构进行预测分析.[结果]序列分析结果表明,HsHDR1基因编码区长为1431 bp,编码476个氨基酸残基,与龙骨马尾杉的HDR序列相似性最高,达95％; HsHDR2基因编码区长为1428 bp,编码475个氨基酸残基,与龙骨马尾杉的HDR序列相似性达86％.生物信息学预测HsHDR1与HsHDR2蛋白均不含跨膜区和信号肽,最可能定位于质体中.实时荧光定量PCR结果表明这两个基因在蛇足石杉根中表达丰度最高,在茎和叶中表达丰度较低.[结论]该研究首次获得蛇足石杉HsHDR1与HsHDR2基因的编码区序列,为进一步研究HsHDRI与HsHDR2在石杉科植物萜类合成途径中的功能奠定基础.
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