产聚羟基脂肪酸酯的深海细菌的筛选与鉴定

来源 :第五届青年海洋科学研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:w3xiaoyan
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  聚羟基脂肪酸酯(PHA)是微生物体内的一类3-羟基脂肪酸组成的线性聚酯,是微生物应对不利的生存环境时的物质能量储备。PHA具有生物可降解性、生物组织相容性、光学活性、抗凝血性等普通高分子材料无法比拟的特性,具有广阔的应用前景。目前对PHA的研究多以陆生微生物为主,海洋细菌则鲜有报道。与陆地相比,低温、高压、营养缺乏的深海环境给微生物提供了更为严苛的生存条件,使其合成积累PHA的可能性大为增加。本研究从太平洋深海沉积物中分离筛选到了两株具有积累PHA能力的细菌,通过尼罗红染色,可观察到典型的橘红色荧光。进一步,我们对其PHA的特性进行了初步研究。首先采用两步法进行发酵,以营养丰富的液体培养基使细菌快速生长至对数生长期,然后添加辛酸钠作为碳源,继续培养2天。一方面取1ml发酵液,经固定、脱水、包埋、固化、超薄切片、染色后,通过透射电子显微镜观察,发现菌体内具有边缘规则呈圆形的白色颗粒存在,约占菌体体积的2/3,说明了该菌具有较强的PHA合成积累能力。另一方面,将剩余发酵液菌体冻干,采用氯仿进行索式抽提,提取产物经红外光谱、核磁共振氢谱和核磁共振碳谱分析,结果表明两株菌所产的PHA的单体类型以3-羟基丁酸为主,推测其结构可能为聚3-羟基丁酸酯(PHB)。本研究所建立的方法,具有一定的通用性,可用于筛选更多具有PHA合成能力的细菌,获得具有产新型PHA的菌株,从而为PHA的应用奠定基础。
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