论文部分内容阅读
目的 研究认为罗格列酮有保护胰岛β细胞的作用，但其机制一直未明。自噬被认为能抗细胞凋亡，因此本实验旨在探讨自噬在罗格列酮保护胰岛β细胞中的作用及其机制。方法 实验分为对照组、罗格列酮组、BSA组、FFA组、DMSO+FFA组及罗格列酮+FFA等六组诱导INS-1细胞。应用CCK-8法、克隆形成实验观察细胞死亡情况，应用光镜下观察、AnnexinV/PI双染以及DAPI染色等方法检测细胞凋亡的情况；应用GFP-LC3质粒转染INS-1细胞、Western印迹检测LC3Ⅱ的表达以及电子显微镜检测自噬体等方法检测细胞自噬的情况；用Western印迹方法检测罗格列酮及其对照组AMPK及其下游分子TSC1、mTOR蛋白表达情况，用Compound C抑制AMPK后，再检测细胞AMPK及其下游分子的表达、自噬及凋亡情况；用3MA、氯喹抑制自噬后再检测细胞的自噬及凋亡情况。