【摘 要】
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目的:观察PTH(parathyroid hormone,PTH)(1-34)对成骨细胞分化的基础上,研究内源性FGF23(fibroblast growth factor 23,FGF23)对其作用的影响. 方法:采用酶消化法分离培养
【机 构】
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复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室 上海200032
【出 处】
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第九届中国南方骨质疏松论坛暨江西省骨质疏松学术会
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目的:观察PTH(parathyroid hormone,PTH)(1-34)对成骨细胞分化的基础上,研究内源性FGF23(fibroblast growth factor 23,FGF23)对其作用的影响.
方法:采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,应用小发夹RNA(shRNA)干扰技术沉默成骨细胞FGF23表达,应用MTT法和PNPP法检测细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)活性,应用Real-time RT-PCR法检测其FGF23、ALP和骨钙素(OCN)等基因mRNA水平,研究rhPTH(1-34)对培养成骨细胞和FGF23基因沉默细胞的作用.
结果:rhPTH(1-34)对培养成骨细胞增殖促进作用明显,分化促进作用弱.10-10～10-8mol/L rhPTH(1-34)作用3天,细胞增殖率增加31.6～50.5％(P＜0.05),而细胞比活性未见明显改变.同时其ALP和OCN转录水平轻度上调,分别较对照组增加35％(P＜0.05)和16％(P＞0.05).rhPTH(1-34)上调成骨细胞FGF23 mRNA水平(4倍),该作用可被针对FGF23特异的shRNA转染所抑制.FGF23基因沉默后PTH促分化作用明显增强,其ALP和OCN mRNA水平分别较对照组增加1.8倍(P＜0.05)和5.8倍(P＜0.05),显示内源性FGF23对PTH促分化的干扰作用.
结论:内源性FGF23可能参与PTH促分化作用的调节,FGF23上调可干扰PTH的促成骨细胞分化作用.
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