【摘 要】
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探讨和营清热方改善糖尿病视网膜病变血-视网膜屏障渗漏疗效及机制.首先运用高效液相色谱法检测和营清热方主要物质成分，其次采用体外探究结合体内验证进行药效评价及机制探讨。体外:1.构建糖基化终末产物(AGES)模型，观察不同浓度和营清热方对其合成的干预作用;2.通过transwell小室及划痕实验，观察和营清热方是否能够抑制AGEs诱导的视网膜内皮细胞迁移;3.构建体外视网膜内皮细胞单层屏障模型，观察
【机 构】
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上海中医药大学附属龙华医院;香港大学中医药学院 香港大学中医药学院
【出 处】
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世界中医药学会联合会眼科专业委员会第五届学术年会、中国中西医结合学会眼科专业委员会第十三届学术年会、中华中医药学会眼科分
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探讨和营清热方改善糖尿病视网膜病变血-视网膜屏障渗漏疗效及机制.首先运用高效液相色谱法检测和营清热方主要物质成分，其次采用体外探究结合体内验证进行药效评价及机制探讨。体外:1.构建糖基化终末产物(AGES)模型，观察不同浓度和营清热方对其合成的干预作用;2.通过transwell小室及划痕实验，观察和营清热方是否能够抑制AGEs诱导的视网膜内皮细胞迁移;3.构建体外视网膜内皮细胞单层屏障模型，观察和营清热方是否能够改善AGES引发的渗透率;4.最后通过检测RAGE、紧密结合蛋白Claudin-1,ZO-1及信号通路P-Akt蛋白表达强度，观察和营清热方发挥作用的机制。体内:1.建立糖尿病C57小鼠模型，设立正常组、模型组、二甲双胍组、氨基胍组、和营清热方低、高剂量组，分别予以药物治疗8周;2.通过检测空腹血糖、随机血糖，观察各药是否抑制血糖升高;3.通过视网膜消化铺片，观察视网膜微血管病理结构改变;4.通过检测视网膜伊文思蓝渗透率，观察各组血-视网膜屏障破坏程度;5.通过Elisa检测血清AGES浓度;6.采用相关免疫方法，观察视网膜AGE,RAGE,Claudin-1,ZO-1表达,P-Akt表达。结果表明，和营清热方具有保护糖尿病视网膜病变中血-视网膜屏障作用;和营清热方通过降低糖尿病空腹血糖水平、抑制体内AGEs合成、降低RAGE表达有关，P-AKt通路可能是其发挥作用的部分信号通路。
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