【摘 要】
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目的 通过EGFR特异性单链抗体介导siRNA内化入TKIs耐药肿瘤细胞,恢复药物敏感性.方法 1、单链抗体的设计及纯化:设计EGFR特异性scFv/s-9R核酸表达序列并全序列化学合成后连接于表达载体,经酶切鉴定及测序后转化大肠杆菌BL21(DE3).将scFv、s-9R的单克隆工程菌于37℃培养至OD600约为0.4-0.6时,添加异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.
【机 构】
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第四军医大学西京医院呼吸内科 第四军医大学生物化学和分子生物学教研室
【出 处】
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2014中华医学会呼吸病学年会暨第十五次全国呼吸病学学术会议
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目的 通过EGFR特异性单链抗体介导siRNA内化入TKIs耐药肿瘤细胞,恢复药物敏感性.方法 1、单链抗体的设计及纯化:设计EGFR特异性scFv/s-9R核酸表达序列并全序列化学合成后连接于表达载体,经酶切鉴定及测序后转化大肠杆菌BL21(DE3).将scFv、s-9R的单克隆工程菌于37℃培养至OD600约为0.4-0.6时,添加异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.
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