【摘 要】
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目的:利用激光共聚焦显微镜观察HT036与P311的细胞内表达与共定位.方法:构建带绿色荧光的HT036真核表达载体,经鉴定正确后,与前期构建带红色荧光的P311真核表达载体共转染HEK293细胞,同时共转染空载体做对照,激光共聚焦显微镜下观察蛋白在细胞内表达、分布和共定位.结果:HT036真核表达载体经PCR、双酶切和测序鉴定正确,与P311共转染HEK293细胞后,激光共聚焦显微镜观察到绿色和
【机 构】
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第三军医大学西南医院烧伤研究所 创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室 重庆400038
【出 处】
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中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会
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目的:利用激光共聚焦显微镜观察HT036与P311的细胞内表达与共定位.方法:构建带绿色荧光的HT036真核表达载体,经鉴定正确后,与前期构建带红色荧光的P311真核表达载体共转染HEK293细胞,同时共转染空载体做对照,激光共聚焦显微镜下观察蛋白在细胞内表达、分布和共定位.结果:HT036真核表达载体经PCR、双酶切和测序鉴定正确,与P311共转染HEK293细胞后,激光共聚焦显微镜观察到绿色和红色荧光表达.HT036和P311主要分布在细胞胞浆,两者在HEK293细胞中存在共定位,而对照组则无该现象.结论:通过酵母双杂交筛选出的P311相互作用蛋白HT036,在活体细胞内存在空间上的共定位,进一步证明它们之间的相互作用,为探讨P311纤维化机制提供新的切入点.
其他文献
目的:该实验通过人HMGB1突变体的构建及目的蛋白的表达与鉴定,为进一步通过HMGB1突变体蛋白与天然HMGB1竞争结合相应受体面抑制其致炎效应奠定了基础,有望为抗炎治疗提供新型候选制剂,而且有助于揭示HMGB1分子发挥作用的关键区域。方法:在已成功克隆和表达人HMGB1的基础上,采用一步反向PCR致突变法构建人HMGB1 cDNA的六个突变体,并分别克隆于原核表达载体pQE-80L上,表达六个相
目的:构建能在哺乳动物细胞中表达融合蛋白P311-RFP(红色荧光蛋白)的重组载体,并进行细胞内定位研究。方法:将重组载体pCMV-Myc-p311中的目的片段P311定向克隆至红色荧光蛋白真核表达载体pDsRed1-N1中,转染人293细胞后,激光共聚焦显微镜下观察结果。结果:构建好的重组载体pDsRed-p311经双酶切鉴定正确,在293细胞中能表达融合蛋白P311-RFP,激光共聚焦显微镜观
增生性瘢痕(hypertrophic scar,HS)是皮肤创伤异常修复的一种不良结局,成纤维细胞在纤维化发生和瘢痕形成中起着非常重要的作用.前期实验中我们利用基因芯片技术对烧伤后早期增生性瘢痕组织与同体正常皮肤组织的差异表达基因研究中发现在早期增生性瘢痕中p311 (GenBank ID∶ hsu36189)的表达有着显著差异.Pan等6的实验也表明P311能促进成纤维细胞向肌纤维母细胞转化.
Objective To design and prepare 6 recombinant mutant HMGBls(Human High Mobility Group Box 1 Protein) and select the mutants which can combine with HMGB 1 receptors but cannot produce inflammation.To d
目的:观察大面积深度烧伤患者自体脂肪颗粒及微粒皮混合移植对创面术后功能的作用,并初步探讨其机制方法:符合条件的20病例,按照入院先后顺序编号,自身对照,双侧肢体对称部位创面随机分为试验组与对照组,对照组采用自体微粒皮移植,试验组采用自体微粒皮+脂肪颗粒(按照体积比1∶1)混合移植。术后2周、5周、10周测定创面挛缩程度,术后30天、60天、90天观察患肢肘/膝关节活动度,SPSS软件比较两组间差异
目的:调查烧伤病房鲍曼不动杆菌临床分离株的耐药性,了解是否存在介导高水平氨基糖苷类抗菌药物耐药的16S rRNA甲基化酶基因,以及传播机制.方法:收集2006年5月-2007年12月本院烧伤病房临床分离的40株鲍曼不动杆菌;采用K-B法测定其对20种抗菌药物的敏感性;琼脂稀释法测定其对妥布霉素、阿米卡星、庆大霉素、异帕米星、奈替米星、卡那霉素6种氨基糖苷类抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC); PCR
耐药的G+细菌感染是烧伤后常见的严重感染之一,由于其感染常导致病情复杂化、并发症多发、手术植皮失败、晚期残余小创面经久不愈,故给烧伤治疗带来了较棘手的难题,如何控制严重烧伤后耐药G+细菌感染是危重烧伤救治成功与否的关键之一。
目的:探讨多个手指皮肤套状撕脱伤指骨外露创面的治疗方法。方法:采用多个手指同时埋入同侧腹壁皮下,4周后取出,手指皮瓣包裹或游离植皮。结果:62例患者,尽可能地保存了手指的长度,功能基本恢复。结论:腹部袋状皮瓣修复多个手指皮肤套状撕脱伤是一种有效的方法。