【摘 要】
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为深入了解红螯光壳螯虾酚氧化酶原(proPO)基因的非特异性免疫机制,利用RACE技术从红螯光壳螯虾血细胞中克隆到酚氧化酶原基因CqproPO,CqproPO基因cDNA全长为2962bp,开放阅读框为1998bp,编码665个氨基酸,其结构中含有两个铜离子结合位点,预测分子量为75.86KDa;同源性比对结果显示红螯光壳螯虾CqproPO与克氏原螯虾酚氧化酶原的同源性最高为79%,其次是淡水螯虾
【机 构】
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宁波大学海洋学院,浙江宁波315211;华东师范大学生命科学学院,上海200062 华东师范大学生
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为深入了解红螯光壳螯虾酚氧化酶原(proPO)基因的非特异性免疫机制,利用RACE技术从红螯光壳螯虾血细胞中克隆到酚氧化酶原基因CqproPO,CqproPO基因cDNA全长为2962bp,开放阅读框为1998bp,编码665个氨基酸,其结构中含有两个铜离子结合位点,预测分子量为75.86KDa;同源性比对结果显示红螯光壳螯虾CqproPO与克氏原螯虾酚氧化酶原的同源性最高为79%,其次是淡水螯虾74%、挪威龙虾69%、美国龙虾67%等;进化分析发现CqproPO与克氏原鳌虾、淡水螯虾、挪威龙虾、美国龙虾等虾的酚氧化酶原亲缘关系最近;Realtime-PCR实验结果表明,CqproPO在血细胞中表达水平最高,其次是肠、触角腺、鳃等;在肝胰腺中有适量表达;WSSV感染后红螯光壳螯虾CqproPO mRNA在血细胞、肝胰腺和鳃组织中具有不同的时空表达趋势,但感染组和免疫后感染组mRNA表达量分别在感染后12h和24h达到最大值,且在3种组织中2个感染组的CqproPO表达量约为对照组的1.3-2.55倍,显著高于对照组(P<0.05),之后CqproPO基因的转录水平明显下降.免疫后再受病毒感染的虾,CqproPO mRNA的表达量在3种组织中总体高于感染组,感染7d后的免疫保护率达到51.86%,表明免疫增强剂可使机体的抗病毒能力增强,对防御WSSV感染具有一定的免疫保护作用.
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实验旨在研究低盐度(0.50-1.20gL-1)条件下凡纳滨对虾的亮氨酸需求量.采用鱼粉和花生粕为蛋白源,使用L-晶体氨基酸(以羧甲基纤维素预包被),模拟经典商业饲料的氨基酸组成,配制含粗蛋白质410 g kg-1的七种等氮实验饲料,其中饲料L0为不含任何晶体氨基酸的正对照且鱼粉含量为300 g kg-1,饲料L1-L6分别添加L-亮氨酸以配成6种含有15.9-30.9 g kg-1(以干物质计)
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以鱼粉、小麦蛋白粉和氨基酸混合物作为蛋白源配制6种等氮等脂的半纯合饲料(粗蛋白水平为43.0%,脂肪水平为7.0%),饲料中亮氨酸水平为2.21、2.33、2.43、2.63、2.78、2.94%,实验每组设3个重复,每个重复40尾虾,每天饲喂4次(7:00,12:00,17:00,21.00),饲养凡纳滨对虾(初始体重为0.53g±0.00g)8周,以确定凡纳滨对虾对亮氨酸的需要量.结果表明,饲
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本试验旨在研究在饵料中添加表达WSSV外膜蛋白VP28的重组枯草芽孢杆菌对南美白对虾免疫力和抗病毒感染的影响.将18000尾初始体重为0.68±0.03g南美白对虾随机分为三组,对照组1投喂普通对虾饵料,对照组2和VP28组分别投喂添加105CFU/g饲料的表达VP28和含空载体的枯草芽孢杆菌的普通对虾饵料.每组设三个重复,每重复2000尾,养殖40d.结果表明:VP28组南美白对虾肝胰脏ACP、
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