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目的 气道神经源性炎症在哮喘发病机制中日益引起关注.神经源性炎症是指由气道感觉神经末梢释放的感觉神经肽所介导的炎症.神经激肽A(neurokinin A NKA)是气道重要的感觉神经肽之一,NKA通过其特异的细胞受体(NK2)而发挥生物活性.本实验旨在研究吸入糖皮质激素对哮喘豚鼠气道及肺组织中NK2受体表达的影响.
方法 用卵蛋白超声雾化吸入法致敏豚鼠20只,随机分为哮喘组和治疗组.哮喘组用卵蛋白超声雾化吸入法致敏及诱喘,制作豚鼠哮喘模型;治疗组于诱喘前7天吸入糖皮质激素(布地奈地悬浊液),每日两次至诱喘当天(共8天).另取10只豚鼠用生理盐水替代卵蛋白及糖皮质激素同期吸入作对照组.哮喘组和治疗组均于诱喘后24小时取材,对照组同期取材.留取气管及肺组织于含I‰DEPC的多聚甲醛固定及肺组织标本冻存.用原位杂交方法检测NK2受体mRNA表达的部位和分布;用反转录多聚酶链式反应检测肺组织中NK2受体mRNA的相对含量.
结果 1.光镜下哮喘豚鼠气管、支气管及肺组织中均可见到有NK2受体mRNA的表达明显,着色呈棕黄色,主要分布于气管、支气管的纤毛黏膜下平滑肌周围;肺实质和间质及血管周围也有少量表达.正常对照组在上述部位表达微弱.哮喘豚鼠吸入糖皮质激素后,光镜下可见NK2受体mRNA在哮喘豚鼠气管、支气管及肺组织中的表达,但其着色及密度均明显减弱,甚至消失.2.统计学分析显示,哮喘豚鼠气管黏膜下和平滑肌周围NK2受体mRNA相对含量较正常对照组明显升高(P＜0.05);哮喘豚鼠吸入糖皮质激素后,气管黏膜下和平滑肌周围NK2受体mRNA相对含量较哮喘组明显减低(P＜0.05),但较正常对照组比较无统计学差异,P＞0.05.3.哮喘豚鼠肺组织中NK2受体mRNA的表达的含量较正常对照组显著增高,P＜0.05吸入糖皮质激素组哮喘豚鼠肺组织中NK2受体mRNA的表达的含量较喘豚鼠显著减低,P＜0.05,同正常对照组无统计学差异,P＞0.05.
结论 1.哮喘时NK2受体mRNA表达明显上调,主要分布于气管、支气管黏膜下和平滑肌周围;2.哮喘时气管、支气管黏膜下和平滑肌周围以及肺组织中NK2受体mRNA表达的相对含量增高;3.吸入糖皮质激素可降低哮喘时气管及肺组织内NK2受体mRNA表达的分布及相对含量.