食管癌相关基因1编码蛋白的相互作用蛋白筛选.pdf

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编号:20190131042520676108    类型:共享资源    大小:105.89KB    格式:PDF    上传时间:2019-02-16
  
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食管癌 筛选食管癌 PDF 蛋白相互作用 蛋白1 编码的 的作用 1基因 蛋白基因 基因的 编码1 编码蛋白 相关基因 相互作用蛋白 1蛋白 1的编码蛋白 食管癌的 相关的 相互作用蛋白的 食管癌相关基因
资源描述:
基 金 项 目:国 家 重 点 基 础 研 究 发 展 规 划 资 助 项 目 (!“##$%36;个转化子, ’) 个克隆有报告基因的表达。排除假阳性后, 得到 ’ 个阳性克隆, 它们分别 编码 ?@A.“ (BC8.@;D:E68D@;F A; G@;F:E 2EHD:@;.“) 和 IJ01 (68D@;.K@;L@;F 2EHD:@;.’$%) 。结论+,-!.“ 基因编 码蛋白在酵母中可特异性的结合 ?@A.“ 和 IJ01, 提示 +,-!.“ 可能通过与 ?MN.“、 IJ01 相互作用参与 调控细胞周期的运行。 【主题词】食管癌相关基因 “; 蛋白.蛋白相互作用; 酵母双杂交系统 !“#$%8(: *’? @:A *’? 3“5H O;L:EPD6;L DQ: EH7: DQ6D :PH2Q6F:67 8;68:E E:76D:L F:;:.“ (+,-!.“)276CP 6;L DH P:6E8Q GHE +,-!.“.@;D:E68D@;F 2EHD:@;PR @;L:2:;L:;D D6;PGHEB6;DP P8E::;:L, ’) 87H;@:P :SQ@K@D:L DQ: :S2E:PP@H; HG E:2HED:E F:;:R 1GD:E :7@B@;6D@;F DQ: G67P: 2HP@D@U: 87H;@:P,DTH 8/01 GE6FB:;DP T:E: HKD6@;:LR /01 P:WO:;8@;F E:U:67:L DQ6D H;: :;8HL:L ?@A.“ (?C8.@;D:E68D@;F N; G@;F:E 2EHD:@;.“) ,6;L 6;HDQ:E :;8HL:L IJ01 (68D@;.K@;L@;F 2EHD:@;.’$%) ,?@A.“,K:@;F 6 N; G@;F:E 2EHD:@;,8HO7L K: KHO;L DH 2“L 68D@U6D:L DQ: DE6;P8E@2D@H;R IJ01,K:@;F 6; 68D@;.K@;L@;F 2EHD:@; DHH(*%/3.)(*+,-!.“ @P 6K7: DH K: P2:8@G@8677C KHO;L DH ?@A.“ 6;L IJ01 @; DQ: C:6PDR MD B6C 276C 6 EH7: @; DQ: E:FO76D@H; HG 8:77 8C87: U@6 @;D:E68D@H; T@DQ ?@A.“ 6;L IJ01R 【!36:“%+ 5($0.】 +,-!.“; YEHD:@;.2EHD:@; @;D:E68D@H;; Z:6PD DTH.QCKE@L PCPD:B 食管癌相关基因 “ (+,-!.“) 是我们克隆的一个 新的食管癌相关基因, 开放读码框全长 “ ’.+,-.?+ 载体得到 7?@A;.“6!57.8 (8)9 : 8 );) , 重组体 转化 -B89C, 观察报告基因表达与否。 3* 人 胎 肝 脏 文 库 转 化 与 筛 选: 用 47?@A;. “6!57.8 小量转化酵母菌 -B89C, 铺于 D+E.AF 平 板上筛选阳性克隆; 再用文库质粒转化已含有 47?@A;.“6!57.8 质粒的 -B89C, 转化菌铺于 8E.BIJE.-K./0G (阴性对照, 其编码蛋白 /0GI$ ’ 几 乎不与其他蛋白发生相互作用) 、 7?@A;.+,-.?+、 7?@A;.“6!57.8 共 转 化 -B89C, 观 察 报 告 基 因 (-+6)、 BPD2、 “0’1) 的表达情况。 ;*+,- 序列测定及分析: 以 70“3 D.“6!57.8 质粒的酵母菌 -B89C, 累 计得到约 2 U 89Q个转化子, 其中有 )2 个为 -K.“6!57.8 共转化 -B89C, 可激活报告基因的 表达 (-+6)O、 BPD2O、“0’1O) ; 与 7?@A;./0G 和 7?@A;.+,-.?+ 共转化, 未观察到报告基因的表达 (图 8, )) 。 图 ! 阳性克隆在 D+E./9 GG#“E/ 的蛋白.蛋白相 互作用。其基本原理如下: 将诱饵基因与 70“3 +,- 结合结构域 (?+) 拼接成融合基因, 另一个基因或文 库 ’+,- 与 70“3 激活结构域 (-+) 融合, 若酵母中表 ·9))·中华肿瘤杂志 )99) 年 () 。过表达的 012’ 可抑制 诱 发 的 ?2@A7’B@、 20+C““3“% 活 化, 以 及 H: 4$+4;G 1.I J1,7I YFG Y 颜子颖, 王海林, 译G 精编分子生物学实验指南G 第 , 版G 北京: 科学出版社, ,FF=G 4+ 4YG $ 颜子颖, 王海林, 译G 精编分子生物学实验指南G 第 , 版G 北京: 科学出版社, ,FF=G Y+$G 4 BOICOUP @,7P“##OU B,76VLO.9OU ’,OP “#G ’L “#POUL“P.XO 3“PVS“5 RQU MOLO UOMI#“P.QL Z5 -56G (-%E ?,,FF;,,::4:;+4:=:G : 7P“##OU B,BOICOUP @,@.OU8“.OU ’,OP “#G *O3UOTT.QL QR 3,4D2@$Z OW3UOTT.QL Z5 -56 PVUQIMV “TTQ6.“P.QL S.PV -./+,G 2“P )O## %.Q#, HH,, Y: YF+YFFG ; 7OQ“LO ?,BQI3QLLQP ),7P“##OU B,OP “#G HH,, Y: $HH+$H=G = 7“T“C. ’,-“TI9“ N,EVP“ N,OP “#G 0.#“8.L “TTQ6.“POT S.PV 78“9T “L9 UOMI#“POT PU“LTRQU8.LM MUQSPV R“6PQU+ZOP“ T.ML“#.LMG ? %.Q# )VO8,HH,, ;:: ,;=;,+,;=;;G F 1OQL“U9. ’,(##.LMOU+[.OMO#Z“IOU J,0U“L/QTQ !,OP “#G BV5T.6“# “L9 RIL6P.QL“# .LPOU“6P.QL QR R.#“8.L(“6P.L+Z.L9.LM 3UQPO.L+=H)“L9 PI8QU LO6UQT.T R“6PQU UO6O3PQU+“TTQ6.“PO9 R“6PQU G ? %.Q# )VO8, HHH ;4: ;,+ ;=G (收稿日期: HH,+,+YH) ·病例报告· 膀胱原发性恶性淋巴瘤一例 苏震雄李进 【主题词】 膀胱肿瘤; 淋巴瘤 【!“#$%H 88JM, 浅表淋巴结 无肿大, 膀胱区无膨隆, 无叩浊。% 超示膀胱内异常回声, 胸 片无阳性发现。静脉肾盂造影示双肾正常, 膀胱内似有充盈 缺损。于 HH, 年 4 月 F 日行膀胱部分切除术, 术中见肿块 位于膀胱前壁, 突向膀胱腔, 呈菜花状, 约 68 \ Y 68 大小, 表面有点状出血。术后病理检查示: 肿块约 $ 68 \ Y 68 \ ,G 68 大小, 切面呈灰白色, 实性。光镜检查示: 肿瘤组织 侵犯固有膜, 局部累及内层平滑肌。病理诊断:(膀胱) 弥漫 性非霍奇金恶性淋巴瘤, 倾向 _A1, 骨髓检查阴性。 作者单位: $HHHYH 重庆市肿瘤研究所肿瘤内科 (苏震雄) , 病理科 (李进) 术后 Y 月余发现颈部、 腋下肿块, 伴发热、 盗汗、 消瘦而 再次入院。入院查体双侧颈部、 腋下、 胸腹壁均可扪及 , ‘ Y 68 肿块, 质中。胸片示: 双上纵隔增宽, 提示淋巴结肿 大可能; 双肺内病变, 提示淋巴瘤肺内侵袭。% 超示: 腹膜后 多枚淋巴结肿大。临床分期:“% 期, DBD 中+高危。用 )JEB 方案化疗 个疗程, 效果不佳, 要求出院。 讨论有研究显示, 约 $Ha的淋巴瘤发生于结外, 且以 非霍奇金淋巴瘤多见。病理检查是本病确诊的惟一手段。 本例在始发时未发现结内病变, 乳酸脱氢酶异常升高提示有 淋巴瘤可能, 术后病理检查得到确诊。结外淋巴瘤原发于膀 胱者极其罕见。本病治疗以手术、 放疗、 联合化疗为主。但 因经费原因, 本例患者术后未能坚持治疗, 且病情进展快, 估 计预后不佳。 (收稿日期: HH,+,+,H) ·,·中华肿瘤杂志 HH 年 4 月第 $ 卷第 Y 期)V.L ? EL6Q#,-“5 HH,bQ# $,2QGY 万方数据
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