建立胶质瘤细胞诱导分化相关基因谱.pdf

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编号:20181206031651255125    类型:共享资源    大小:122.84KB    格式:PDF    上传时间:2019-02-16
  
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胶质瘤细胞 细胞分化 胶质瘤 pdf 诱导细胞 肿瘤细胞 细胞瘤 诱导分化 瘤相关 诱导胶质瘤 ... 诱导胶质瘤细胞
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基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (!“#$%#5(: 1,!5?1(0 )1=8%:-@,!’AB1’ “(%C59=%:,!’AB1’ DEFGGH,IB%(- 【$.-*,14567894/:; 6 ?;98; 644=+965;0 C95/ 09;B; (# %%% ?;=B; 65;B 9=B +/5;B 5/; 9;B;B6?:;1)!/8-(1). ?;98; 644=+965;0 C95/ 09;B;;B;98;; +,-. 6BB6G 恶性肿瘤的诱导分化治疗是当今的研究热点之 一, 其在白血病方面已取得了突破性进展, 但在人脑 胶质瘤方面相对滞后。我们曾对环己亚甲基二乙酰 胺 (MNO.) 和二甲基甲酰胺 (,NP) 促人脑胶质瘤体 外细胞系 2MKH** 的分化效应进行了研究 [(, $? 8,,, 信号扫描仪, 扫描磷屏, 进行图像分析。膜的 信号分析标准:(%) 两张膜上的背景亮度值均设为 ,; (+) 同一张膜上任意两个对照基因的亮度值差异 在 + 倍之内;(8) 同一张膜上代表同一克隆的两个点 亮度差异在 + 倍之内;(@) 一张膜上同一克隆的两点 亮度分别是另一张膜上对应点亮度的 + 倍以上,可 以确信这个克隆代表的基因在这两种样品中有明显 的表达差异;(.) 有表达差异克隆的两个强信号点亮 度数值都在 %, (肉眼可检测) 以上。 (: 多点杂交 (反 #ABC-DB7) 验证: 挑克隆、 摇菌、 抽质粒、 E3F、 总 F#$ 的抽提同基因芯片方法。向 E3F 产物中加入等体积变性液, G.*变性后冰浴, 备 用。将尼龙膜浸湿后, 置于点膜器上, 抽真空, 将点 膜样品各 %,!0 点在各自相应的点上。以“?$E 表达增强, 细胞运动减 慢, 说明胶质瘤细胞已经诱导分化。 +:F#$ 的抽提: 8 个样品的总 F#$ 经紫外分光 !+(, 、 ! +),测定, 琼脂糖凝胶电泳证明, F#$ 样品合 格。分离得到了足够的 /F#$, 供制备探针用。 8:!“#$ 阵列: 对苯丁酸钠诱导前、 诱导后 + - 和 ( M 的 8 个样品 /F#$ 进行 !“#$ 阵列, 结果符合 信号分析的质量控制标准 (图 %) 。经过扫描, 得到 了 %) ,,, 个基因的表达数据。比较后得到有 + 倍以 上差异的基因如下: 2EP 作用 + - 后与对照相比, 共 有 +. 个基因的表达存在差异, 其中 %G 个已知基因, ( 个表达序列标签 (DQHBDRRDM RDSTD7!D C++!,/0?4@+)567-!+.5/0-,;!,核受体亚家族 +, 组, 成员 , (ED+,)!65-- 1 2?5+,1+!/0+175!,1;/0B+)567;9,. 蛋白 (C:31+5;9. % 的表达水平上调与诱导分化后细胞 凋亡增强有关 [?] 。!19! =P Q.R9S.9!.N V #.I/=I/L,%CC*,?(:?’%1?’?N /=P767@L ILL.!/7; 7@ QIS9@ Q.;9,Q.@T60I7X.@. =P S967L@9@N V #.I/==@!=6,%CC?,’4:C41 %E?N ) B7@.9I +,3I:L7@ KY,G7I G,.=S. ;/=67P./9 9@96=LN -7=!Q.S7 BQ9/S9!=6,%CC*,).!7P7!7. F 96;Q9 9@: \.=.@\TS.N DI/ V -7=!Q.S,%CC’,&%*:)C41*E*N (收稿日期: &EE%1%&1%C) ·)&&·中华肿瘤杂志 &EE& 年 ) 月第 &( 卷第 ’ 期FQ7@ V ,@!=6,O9T &EE&,A=6 &(,#=N’ 万方数据
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