川崎病和败血症患儿血浆可溶性p-选择素水平检测.pdf

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编号:20181111054838106220    类型:共享资源    大小:215.32KB    格式:PDF    上传时间:2019-02-16
  
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』!!竺璺!坚兰些呈g!塾竺望翌i!!垡亚l坚!尘!塑坠堡呈!!12 曼!巳: 兰塑璺 !型:塑 坠:曼 3讨论 作者通过扫描电镜观察到的正常阴道毛滴虫的 形态与高兴政等”1描述类似。证实波动膜除与虫 体纵轴平行外,有时与纵轴成一角度。 药物作用后阴道毛滴虫扫描电镜结果显示虫体 表面仅显示大小不等的小泡、表面粗糙,其他形态结 构与正常滴虫基本相似,提示甲硝唑对阴道滴虫的 表膜结构作用不大,这与作者在光镜下观察的结果 相一致。 作者观察到的正常阴道滴虫透射电镜的形态结 构与杜之鸣等H o的描述基本类似。国内外有关阴 道毛滴虫具有吞噬阴道上皮细胞、红细胞、白细胞 等”o功能虽有报道,但吞噬的过程尚未见报道。作 者的观察结果为阴道滴虫的吞噬功能研究提供了新 的资料。 透射电镜观察结果显示,用药后,甲硝唑作用于 虫体,主要表现为细胞质内出现空泡、裂隙及核内裂 隙、核变形、内质网消失,部分胞质变性并向四周扩 展,并随作用时间的延长而加重,提示虫体代谢、蛋 白合成及繁殖均受到障碍,但对虫体细胞膜及氢化 酶体影响不大。从甲硝唑的杀虫机制来看,其本身 并不具活性,须从敏感的生物体靶细胞内获得独特 的电子,甲硝唑被还原激活,从而发挥药效旧1。这 可能是甲硝唑主要破坏胞内结构,而对细胞膜与氢 化酶体膜等结构影响不大的主要原因。药物作用 后,虫体内出现大量的空泡,这与闫艳等¨1及郭仁 舆等“1观察的现象类同。而自噬泡形成表明虫体 受到严重损伤,并利用自噬作用清除退化、变性的自 身组织成分,这与Carosi等¨’观察的自噬空泡现象 ·921· 类同。 综上所述,在体外甲硝唑对阴道毛滴虫的细胞 膜及氢化酶体作用不大,而阴道毛滴虫细胞内结构 的变化是导致虫体死亡的主要原因。 参考文献 [1]马红钗,沈国理.戚佳叶。等.甲硝唑不良反应[J].现 代中西医结合杂志,2003,12(6):672 [2]Nareisi EM,Secor WE.In vitro effect of tinidazole and fu. razolidone on metronidazole—resistant Trichomonas vaginalis [J].Antimicrob Agents Chemother,1996,40(5):1 121 [3]高兴政,李力,李江红。等.阴道毛滴虫表面结构的扫描 电镜观察[J].北京医科大学学报,1989,21(5):385 [4]杜之鸣,周文琴,韩文素,等.阴道毛滴虫超微结构的进 一步观察【J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志,1990,8 (1):47 [5]Rendon·Maldonado JG,Espinosa·Cantellano M,Gonzalez- Robles A。et a1.Triehomona口vaginal诂:in vitro phagoeyto· sis of lactobacilli。vaginal epithelial cells,leukocytes,and e— rythrocytes[J].Exp Parasitol,1998,89(2):241 [6]Muller M.Reductive activation of nitromidazoles in anaero- bic microorganism[J].Biochem Pharmacol,1986,35(1): 37 [7]囝艳,高兴政.白头翁体外抗阴道毛滴虫透射电镜观察 [J].中国病原生物学杂志,2006,I(1):22 [8]郭仁舆,邱曙东.猪胆汁提取物及去氧胆酸钠对人阴道 毛滴虫作用的电镜观察[J].西安医科大学学报,1986, 7(2):126 [9]Carosi G,Filice G,Suter F,et a1.Trichomonas vaginalis: effcct of tinidazole Oil ultrastructure in vitro[J].Exp Par- asitol,1977,43(2):315 (2007.Il-08收稿 责任编辑赵秋民) 川崎病和败血症患儿血浆可溶性P-选择素水平检测木 徐灵敏1’ 贾莉婷2’董子明3’ 胡素君1’ 栾斌1’ 张展2’# 1)郑州大学第三附属医院儿内科郑州450052 2)郑州大学第三附属医院检验科郑州450052 3)郑州大学基础医学院病理 生理学教研室郑州450001 撑通讯作者,女,49岁,博士,教授,研究方向:临床免疫检验学,E.mail:zhangzhanmd@yahoo.tom.cn 关键词川崎病;儿童;P-选择素;败血症 ·河南省医学卫生重点科技基金资助项目20023003 万方数据 ·922· 中图分类号R725 摘要目的:探讨血浆可溶性P-选择素(sPS)水平的变化对d,JL JIl崎病(KD)和败血症的临床诊断价值。方 法:应用ELISA双抗体夹心法检测40例KD和40例败血症患儿治疗前后血浆sPS水平的变化,以30例健康儿童 为对照组。结果:治疗前后KD组((62.67±4.82)tLg/L,(57.96±7.55)肛g/L)和败血症组((65.67 4-6.82)斗g/ L,(15.46±6.82)¨g/L)患儿的血浆sPS水平均明显降低,且均高于对照组((7.14±2.16)斗g/L);治疗后KD组 高于败血症组(P均0.05。 1.2方法标本采集和处理:KD和败血症组患儿 于入院时和治疗后体温正常5—7 d,NC组于体检 时,均于临床检验取血同时留取实验所用血浆,放入 万方数据 一70℃冰箱保存,分批检测。sPS的测定:使用 ELISA双抗体夹心法,试剂购自上海船夫生物科技 有限公司,原产地为美国R&D systems INC,酶联免 疫检测仪为muhiskan MK2型(芬兰lab systems公司 生产)。抗人sPS单抗包被于酶标板上,标准品和样 品中的sPS与单抗结合,加入生物素化的抗人sPS 抗体,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶 标记的链球菌抗生物素蛋白与生物素结合,加入酶 底物显色剂,出现黄色,加终止液硫酸,颜色变深,测 D(492 nm)值,sPS浓度与D(492 nm)值成正比,由计 算机软件通过绘制标准曲线求出标本中siS浓度。 1.3统计学处理 实验数据用舅±s表示。采用 SPSSl 1.5统计学软件分别进行配对t检验和单因素 方差分析。检验水准Ot=0.05。 2 结果 治疗前后3组血浆sPS水平比较见表1。 表1 治疗前后3组血浆sPS水平比较 斗g·L一 ·与NC组比较,PO.Ol;#与败血症组比较,PO.Ol 由表1可知,治疗前KD组和败血症组血浆sPS 水平均明显高于NC组,败血症组与KD组相比差异 无统计学意义;治疗后KD组和败血症组血浆sPS 水平均明显降低,但仍高于NC组,且KD组高于败 血症组,差异均有统计学意义(P0.01)。 3 讨论 白细胞黏附、穿越血管内皮细胞向炎症部位移 行是炎症过程的重要特征,其分子基础在于白细胞 与血管内皮细胞表面黏附分子的相互作用以及细胞 因子等对黏附分子表达的调解“o。PS是黏附分子 选择素家族中的一员,属跨膜糖蛋白,通常储存于内 皮细胞和血小板的分泌颗粒中,当内皮细胞和血小 板受到凝血酶或组胺等炎性因子刺激后,Ps迅速表 达于细胞表面,介导白细胞的黏附及向炎症部位移 行“o。sPS是由于mRNA剪接方式不同而产生的相 对分子质量较小的Ps,以可溶性形式存在于血浆 中,血浆sPS水平可反映PS的表达和代谢状况,便 于临床检测以指导诊断和治疗¨1。 近几年的研究发现,KD和败血症患儿Ps表达 水平均上调,血浆sPS均增高p…,本研究结果显示, KD和败血症患儿血浆sPS水平治疗前后均显著高 于NC组,与上述研究一致。提示KD和败血症的发 病均与炎症反应有关,这是2者出现许多类似临床 表现的病理生理学基础。作者以前的研究表明,随 着类风湿及风湿热发病率的下降,KD的临床诊断 主要是需与败血症进行鉴别诊断¨1。虽然KD和败 血症的发病均与炎症反应有关,急性炎症期2者血 浆sPS均增高¨刮,但是,2者炎症反应发生的病因 和经过有许多不同之处。本研究结果显示,KD组 和败血症组患儿治疗前血浆sPS水平并无差异,治 疗后KD组高于败血症组。KD组治疗前后血浆sPS 水平变化不如败血症组患儿明显,是与KD需较长 期的抗炎抗凝治疗的免疫病理生理学基础相符的。 KD组治疗前后血浆sPS水平变化不明显,可作为治 疗观察中确诊KD排除败血症的一个重要指标。对 于KD,临床表现消失出院后还需要至少6—8周的 维持治疗和1—2 a的随访观察以防冠状动脉病变 的发生,出院时进一步明确诊断具有重要的临床 价值。 参考文献 [1]杨锡强,易著文.儿科学[M].北京:人民卫生出版社, 2004. [2]Freeman AF,Shulman ST.Kawasaki disease:summary of the American Heart Association guidelines[J].Am Faro Physician。2006,74(7):l 141 [3]Miura M,Garcia FL,Crawford SE,et a1.Cell adhesion mole— eule expression in corollary artery aneurysms in acute Ka· wasaki disease[J].Pediatr Infect Dis J,2004,23(10):931 【4]仇烨,吴杰,房晓,等.P选择索及E选择索在小儿川崎 病血管损伤中的作用机制及其意义[J].中华儿科杂 志,2004,42(9):688 [5]Laschke MW,Menger MD,Wang Y,et a1.Sepsis—associ· ated cholestasis is criticaHy dependent on P·-selectin··de·- pendent leukocyte recruitment in mice[J].Am J Physiol Gastrointest Liver Physio,2007,292(5):GI 396 [6]Figueras-Aloy J,G6mez—L6pez L,Rodriguez-Migu6iez JM, et a1.Serum soluble ICAM一1,VCAM-1,L·selectin。and P.selectin Levels as markerfl of infection and their relation to clinical severity in neonatal sepsis[J].Am J Perinatol, 2007。24(6):331 [7]龚非礼.医学免疫学[M].北京:科学出版社。2006. [8]徐灵敏,朱艳玲.王军,等.川I崎病的早期诊断和鉴别诊 断[J].中国综合临床,2007,23(10):953 (2007-09:1 l收稿责任编辑徐春燕) 万方数据
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